I.
Pemeriksaan Coliform
a. Tujuan
: Agar mahasiswa mampu memeriksa
angka kuman MPN
Coliform tinja dari suatu sampel air sumur
gali.
b. Materi : Pemeriksaan Coliform Tinja
Dasar Teori : MPN ( Most Probable Number ) adalah
perkiraan terdekat jumlah . Bakteri Coliform
adalah bakteri golongan coli yang ditandai dengan kemampuan bakteri itu
menguraikan lactose menjadi asam dan gas di dalam media Briliant Lactose Broth
pada inkubasi suhu 37˚ C selama 2x24 jam . Contoh : Genus Klebsiella , Genus
Enterobacter , Genus Eschericia . Coliform tinja adalah coliform yang mampu
tubuh pada suhu 44,5˚ C 24 jam dan Escherichia coli adalah bakteri gram negatif
berbentuk batang yang menguraikan lactose menjadi gas, memproduksi indol, dan
simmon’s citrate negatif.
c. Alat
dan Bahan :
Alat :
|
No
|
Nama Alat
|
Jumlah(Buah)
|
|
1
|
Rak Kayu
|
1
|
|
2
|
Inkubator
|
1
|
|
3
|
Tabung
Erlenmeyer
|
1
|
|
4
|
Tabung reaksi
dan durham
|
30
|
|
5
|
Ose
|
2
|
|
6
|
Api bunsen
|
1
|
Bahan :
|
No
|
Nama Bahan
|
Jumlah
|
|
1
|
Air sumur gali
|
|
|
2
|
BGLB
|
|
|
3
|
LB
|
|
d. Prosedur
Kerja
1.) Menyusun
media LB dalam rak tabung dengan ragam 5:5:5
2.) Menulis
kode ,tanggal penanaman dan volume sampel ,dan nama pemeriksa.
3.) Mengocok
sampel dan mengambilnya dengan pipet steril 10 ml dan memasukkan ke dalam
tabung LB sebanyak 5 tabung , dan mengambil 1 ml sampel kemudian memasukkannya
ke Lb 0,5 tabung LB 0,5% sebnyak 5
tabung.
4.) Menggoyangkan
rak yang berisi LB hingga homogeny .
5.) Mengeramkan
pada incubator dengan suhu 37ºC selama 2x24 jam .
6.) Setelah
2x24 jam mengamati pertumbuhan bakteri , jika terdapat gelembung gas pada
tabung durham maka tabung positif , sedangkan jika tak ada gelembung gas maka
tabung negative.
7.) Memilih
tabung yang positif dan melanjutkan dengan tes penegasan.
Tes Penegasan
1.) Menyiapkan
media BGLB sebanyak 15 buah denganragam 5:5:5
2.) Setelah
itu memberi kode sampel ,tanggal penanaman, dan kemudian memindahkan bakteri
yang berada dalam LB (tabung positif) ke dalam media BGLB menggunakan ose.
3.) Mengeramkan
tabung pada incubator 37ºC selama 2x24 jam .
4.) Mengamati
pertumbuhan bakteri pada tabung BGLB , mencatat tabung yang positif .
5.) Mencocokkan
tabung yang positif dengan table MPN coliform dengan ragam 5:5:5.
e. Hasil
Kerja
|
No
|
Hasil Pengamatan
|
Ragam yang dipakai 5:5:5
|
|||||||
|
Kode Sampel
|
Tanggal
|
Tes Perkiraan
|
Tes Penegasan
|
MPN Coli / 100Ml
|
|||||
|
10 ml
|
1 ml
|
0,1 ml
|
10 ml
|
1 ml
|
0,1 ml
|
||||
|
1.
2.
3.
|
10 ml :
A
B
C
D
E
1ml :
F
0,1ml:
G
|
|
+
+
+
+
+
+
+
|
+
+
+
+
+
+
+
|
+
+
+
+
+
+
+
|
+
+
+
+
+
+
+
|
+
+
+
+
+
+
+
|
+
+
+
+
+
+
+
|
≥1898
|
f. Pembahasan
Dari perhitungan
berdasarkan table MPN Coliform dapat di ketahui index MPN adalah 1898 per 100
ml.
Berdasarkan
praktikum yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa:
Pada pemeriksaan bakteriologi air, untuk mengetahui jumlah
bakteri coliform danE.Coli dapat
dilakukan dengan metode MPN (Most Probable Number) atau JumlahPerkiraan Terdekat.
MPN adalah suatu teknik
enumerasi pada mikrobia (dalam hal ini coliform fecal), pada suatu bahan cairan.
Di dalam praktikum ini menggunakan Metode MPN yang
terdiri terdiri dari dua tahap, yaitu uji pendugaan dan uji penegasan.
Dalam uji
tahap pertama, keberadaan coliform menunjukkan positif di dalam setiap tabung
sampel; masih dalam dugaan. Organisme kelayakan konsumsi air atau bahan pangan
cair adalah kelompok bakteri koliform yaitu: spesies Eschrichia, Enterobacter
dan Klebsiella..
1.
Pada tes penegasan, pada sampel air kran yang diinkubasi pada suhu 37º C selama
2x24 jam untuk indentifikasi adanya coliform maka semua tabung menunjukkan
confirmative positif. Sehingga angka yang diperoleh untuk menunjukkan
confirmative positif adalah :5-1-1 dan index MPN yang diperoleh yaitu
≥979/100ml..Sehingga sampel air
tersebut masih layak untuk dikonsumsi Karen bakteri coli yang terdapat dalam
sampel air bersifat nonpatogen , bakteri akan mati dalam suhu pemasakan 100ºC.
